Bisakah Anda mengurutkan produk PCR?
Bisakah Anda mengurutkan produk PCR?

Video: Bisakah Anda mengurutkan produk PCR?

Video: Bisakah Anda mengurutkan produk PCR?
Video: Basic Concepts 01 - Polymerase Chain Reaction (PCR) 2024, November
Anonim

Langsung Pengurutan dari Produk PCR . Sangat mungkin untuk langsung urutan A produk PCR tanpa terlebih dahulu mengkloning fragmen. Langsung sekuensing PCR jarang berhasil kecuali Anda luangkan waktu untuk memastikan itu Anda tidak jatuh ke dalam satu dari sekian banyak jebakan.

Dengan cara ini, apa itu sequencing PCR?

Langsung Pengurutan dari PCR Produk. Anda harus menghapus semua PCR primer dan nukleotida tak tergabung sebelum produk berurutan . Pengurutan hanya menggunakan satu primer, bukan dua yang digunakan dalam PCR . Jika Anda tidak menghapus kedua primer, Anda akan mendapatkan dua urutan ditumpangkan satu sama lain yang tidak dapat dibaca.

Demikian juga, dapatkah saya menggunakan primer PCR untuk pengurutan? PCR primer dimaksudkan untuk PCR amplifikasi untuk mendapatkan amplikon. Sequencing primer adalah digunakan ke urutan fragmen DNA dan mengungkapkan DNA-nya urutan mengenali. 4. Dua PCR primer dibutuhkan dalam PCR reaksi (biasanya); hanya satu pengurutan primer ditambahkan ke pengurutan reaksi.

Dengan mengingat hal ini, bagaimana Anda menguji produk PCR?

Deteksi dan analisis produk PCR . NS produk dari a PCR harus berupa fragmen atau fragmen DNA dengan panjang tertentu. Banyak teknik dapat digunakan untuk mendeteksi urutan yang diperkuat (lihat Tabel). Teknik yang paling sederhana dan umum digunakan adalah elektroforesis dari produk PCR pada gel agarosa dengan EtBr (ethidium bromide).

Mengapa produk PCR perlu dimurnikan sebelum diurutkan?

Pemurnian DNA dari PCR reaksi biasanya diperlukan untuk penggunaan hilir, dan memfasilitasi penghapusan enzim, nukleotida, primer dan komponen buffer.

Direkomendasikan: