Bagaimana cara kerja pengurutan DNA Sanger?
Bagaimana cara kerja pengurutan DNA Sanger?

Video: Bagaimana cara kerja pengurutan DNA Sanger?

Video: Bagaimana cara kerja pengurutan DNA Sanger?
Video: Sekuensing DNA 2024, November
Anonim

Urutan Sanger menghasilkan pembentukan produk ekstensi dengan berbagai panjang yang diakhiri dengan dideoksinukleotida pada ujung 3'. Produk ekstensi kemudian dipisahkan oleh Elektroforesis Kapiler atau CE. Molekul disuntikkan oleh arus listrik ke dalam kapiler kaca panjang yang diisi dengan polimer gel.

Dengan cara ini, apa metode sekuensing DNA Sanger?

Urutan Sanger , juga dikenal sebagai pemutusan rantai metode , adalah teknik untuk pengurutan DNA berdasarkan penggabungan selektif dideoksinukleotida pemutus rantai (ddNTPs) oleh DNA polimerase selama in vitro DNA replikasi. Ini dikembangkan oleh Frederick Sanger dan rekan pada tahun 1977.

Juga, bagaimana cara kerja pengurutan pemutusan rantai? DNA Sanger pengurutan juga dikenal sebagai rantai - penghentian metode dari pengurutan . ddNTP menghasilkan penghentian untai DNA karena ddNTP tidak memiliki gugus 3'-OH yang diperlukan untuk pembentukan ikatan fosfodiester antara nukleotida. Tanpa ikatan ini, rantai nukleotida yang terbentuk adalah dihentikan.

Sederhananya, mengapa kita melakukan pengurutan Sanger?

Urutan Sanger adalah A metode dari pengurutan DNA berdasarkan penggabungan selektif dideoksinukleotida pemutus rantai dengan DNA polimerase selama in vitro DNA replikasi. Ini masih memiliki keunggulan dibandingkan bacaan pendek pengurutan teknologi (seperti Illumina) yang bisa menghasilkan urutan DNA pembacaan > 500 nukleotida.

Apakah pengurutan Sanger akurat?

Urutan Sanger dengan 99,99% ketepatan adalah "standar emas" untuk penelitian klinis pengurutan . Namun, teknologi NGS yang lebih baru juga menjadi umum di laboratorium penelitian klinis karena kemampuan throughputnya yang lebih tinggi dan biaya per sampel yang lebih rendah.

Direkomendasikan: