Bagaimana kloning Gibson bekerja?
Bagaimana kloning Gibson bekerja?

Video: Bagaimana kloning Gibson bekerja?

Video: Bagaimana kloning Gibson bekerja?
Video: Рабочий процесс сборки Gibson 2024, November
Anonim

NS Kloning Gibson Master Mix terdiri dari tiga enzim berbeda dalam satu buffer. Setiap enzim memiliki fungsi spesifik dan unik untuk reaksi: T5 Exonuclease - menciptakan DNA untai tunggal 3' yang menggantung dengan mengunyah kembali dari ujung DNA 5'. Fragmen DNA komplementer selanjutnya dapat menyatu satu sama lain.

Mempertimbangkan ini, bagaimana cara kerja Gibson?

NS Gibson Metode Assembly® adalah prosedur kloning yang memungkinkan kloning dua atau lebih fragmen tanpa memerlukan pencernaan enzim restriksi atau situs restriksi yang kompatibel. Sebagai gantinya, ujung tumpang tindih yang ditentukan pengguna dimasukkan ke dalam fragmen untuk memungkinkan penggabungan fragmen yang berdekatan dengan mulus.

Demikian pula, apa yang ada di Gibson Assembly Master Mix? NS Campuran Master Kloning Gibson terdiri dari tiga enzim yang berbeda dalam buffer tunggal. Setiap enzim memiliki fungsi spesifik dan unik untuk reaksi: T5 Exonuclease - menciptakan DNA untai tunggal 3' yang menggantung dengan mengunyah kembali dari ujung DNA 5'. Fragmen DNA komplementer selanjutnya dapat menyatu satu sama lain.

Dengan cara ini, bagaimana cara kerja perakitan Golden Gate?

Gerbang Emas kloning atau Perakitan Golden Gate adalah metode kloning molekuler yang memungkinkan peneliti untuk secara simultan dan terarah merakit beberapa fragmen DNA menjadi satu bagian menggunakan enzim restriksi Tipe II dan ligase DNA T4. Ini perakitan adalah dilakukan secara invitro.

Bagaimana cara kerja kloning Gateway?

NS Kloning GATEWAY Teknologi didasarkan pada sistem rekombinasi situs-spesifik yang digunakan oleh fag l untuk mengintegrasikan DNA-nya di E. Situs attL dan attR di sekitar fag yang disisipkan DNA rekombinasi situs-khusus selama peristiwa eksisi untuk mereformasi situs attP di fag l dan situs attB di E.

Direkomendasikan: