Mengapa enzim restriksi tidak dipotong?
Mengapa enzim restriksi tidak dipotong?

Video: Mengapa enzim restriksi tidak dipotong?

Video: Mengapa enzim restriksi tidak dipotong?
Video: #Rekayasa Genetika - enzim restriksi 2024, November
Anonim

Mungkin ada beberapa alasan berbeda mengapa Anda enzim restriksi tidak memotong DNA seperti yang diulas dalam video ini. Persiapan DNA yang akan dibelah Sebaiknya bebas dari kontaminan seperti fenol, kloroform, alkohol, EDTA, deterjen, atau garam berlebihan, yang semuanya dapat mengganggu enzim restriksi aktivitas.

Dalam hal ini, mengapa enzim restriksi tidak memotong DNA bakteri?

Bakteri memiliki enzim restriksi , disebut juga endonuklease restriksi , yang memotong beruntai ganda DNA pada titik-titik tertentu menjadi fragmen-fragmen. Menariknya, enzim restriksi jangan membelah diri mereka sendiri DNA . Bakteri mencegah mereka sendiri DNA dari ditebang oleh enzim restriksi melalui metilasi larangan situs.

Orang mungkin juga bertanya, di mana enzim restriksi dipotong? Enzim Pembatasan Tipe Umumnya, Tipe I enzim dipotong DNA di lokasi yang jauh dari urutan pengenalan; Tipe II memotong DNA di dalam atau dekat dengan urutan pengenalan; Tipe III memotong urutan pengenalan dekat DNA; dan Tipe IV membelah DNA termetilasi.

Demikian pula, ditanya, apa yang terjadi jika Anda menambahkan terlalu banyak enzim restriksi?

Pencernaan yang tidak sempurna dapat terjadi ketika terlalu banyak atau juga kecil enzim digunakan. NS adanya kontaminan dalam NS sampel DNA bisa menghalangi enzim , juga mengakibatkan pencernaan yang tidak lengkap. Beberapa enzim restriksi membutuhkan kofaktor untuk aktivitas penuh.

Mengapa intisari pembatasan saya tidak berfungsi?

Tidak lengkap atau tidak pencernaan karena aktivitas enzim diblokir oleh metilasi DNA. Jika enzim Anda aktif dan mencerna mengontrol DNA dan NS reaksi diatur menggunakan kondisi optimal, tetapi Anda masih melihat masalah dengan pencernaan , mungkin karena NS enzim dihambat oleh metilasi NS DNA cetakan.

Direkomendasikan: