Daftar Isi:

Bagaimana cara memasukkan gen ke dalam plasmid?
Bagaimana cara memasukkan gen ke dalam plasmid?

Video: Bagaimana cara memasukkan gen ke dalam plasmid?

Video: Bagaimana cara memasukkan gen ke dalam plasmid?
Video: AP Biology: рестрикционные ферменты переваривают циркулярные плазмиды 2024, November
Anonim

Langkah-langkah dasarnya adalah:

  1. Potong terbuka plasmid dan "tempel" di gen . Proses ini bergantung pada enzim restriksi (yang memotong DNA) dan DNA ligase (yang menggabungkan DNA).
  2. Memasukkan NS plasmid menjadi bakteri.
  3. Tumbuh banyak plasmid -membawa bakteri dan menggunakannya sebagai "pabrik" untuk membuat protein.

Juga, bagaimana gen dapat dimasukkan ke dalam GCSE plasmid?

ini dimasukkan ke dalam plasmid menggunakan enzim ligase. NS plasmid pergi ke dalam sebuah sel bakteri. bakteri transgenik bereproduksi, menghasilkan di dalam jutaan bakteri identik yang memproduksi insulin manusia.

Selain itu, bagaimana Anda mensubklon sebuah gen? Langkah Dasar untuk Subkloning Anda melepaskan dan memurnikan sisipan Anda dari vektor induk, mengikat sisipan ini ke dalam vektor tujuan yang telah disiapkan, mengubah reaksi ligasi ini menjadi sel bakteri yang kompeten. Kemudian Anda menyaring sel yang diubah untuk sisipan.

Dengan mempertimbangkan hal ini, apa saja 4 langkah kloning gen?

Dalam pencernaan enzim restriksi klasik dan protokol kloning ligasi, kloning setiap fragmen DNA pada dasarnya melibatkan empat langkah:

  • isolasi DNA yang diinginkan (atau DNA target),
  • ligasi,
  • transfeksi (atau transformasi), dan.
  • prosedur penyaringan/pemilihan.

Bagaimana cara mengamplifikasi plasmid?

Prosedur percobaan

  1. Jalankan PCR dan bersihkan produk PCR: Jalankan PCR untuk memperkuat DNA sisipan Anda.
  2. Mencerna DNA Anda:
  3. Pisahkan sisipan dan vektor Anda dengan pemurnian gel:
  4. Ligasi sisipan Anda ke dalam vektor Anda:
  5. Transformasi:
  6. Isolasi Plasmid Selesai:
  7. Verifikasi Plasmid Anda dengan Mengurutkan:

Direkomendasikan: