Bisakah BamHI menjadi nonaktif panas?
Bisakah BamHI menjadi nonaktif panas?

Video: Bisakah BamHI menjadi nonaktif panas?

Video: Bisakah BamHI menjadi nonaktif panas?
Video: PENGOBATAN DENGAN BESI PANAS DI PANGLENGSERAN HAJI SODIK 2024, Mungkin
Anonim

Meskipun NdeI bisa menjadi panas tidak aktif , BamHI -HF tidak bisa.

Dengan cara ini, bagaimana Anda menonaktifkan BamHI?

Panas penonaktifan dilakukan sebagai berikut untuk mendekati percobaan yang khas. Campuran reaksi 50 l yang mengandung NEBuffer yang sesuai, 0,5 g DNA timus anak sapi, dan 5 atau 10 l restriksi endonuklease (pada konsentrasi jual) diinkubasi pada 37°C selama 60 menit dan kemudian pada 65°C atau 80°C selama 20 menit.

Demikian pula, apa situs pembatasan untuk BamHI? BamHI . Larangan endonuklease BamH I terikat pada DNA non-spesifik. BamH I (dari Bacillus amyloliquefaciens) adalah tipe II larangan endonuklease, memiliki kapasitas untuk mengenali urutan pendek (6 b.p.) DNA dan secara khusus membelahnya pada target lokasi.

Dalam hal ini, apakah saya perlu memanaskan enzim restriksi yang tidak aktif?

Inaktivasi dari larangan endonuklease umumnya tidak diperlukan , tetapi dalam beberapa kasus mungkin meningkatkan efisiensi transformasi.

Apa itu inaktivasi panas?

Panas - penonaktifan ( Pemanasan hingga 56°C selama 30 menit) dilakukan untuk menonaktifkan komplemen, sekelompok protein yang ada dalam serum yang merupakan bagian dari respon imun. Panas juga telah digunakan untuk menghancurkan mikoplasma dalam serum.

Direkomendasikan: